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藥物代謝?營養(yǎng)吸收?腸道通透性評價系統(tǒng)

發(fā)布時間:2016/12/27點擊次數:1395

藥物代謝·營養(yǎng)吸收·腸道通透性評價系統(tǒng)

——KingTech系列尤斯灌流系統(tǒng)(Ussing Chamber System

 

【方法簡介】
20世紀50年代,丹麥學者Hans Ussing 將Ussing chamber(尤斯室或尤斯灌流室)介紹于世,該裝置模擬上皮組織在體內的環(huán)境,并能長時間維持其活性;通過微電極檢測跨上皮電信號及其在藥物和營養(yǎng)物質轉運條件下的變化,來反映腸道藥物代謝、營養(yǎng)物質吸收及通透性等的變化。伴隨著Ussing Chamber設計的不斷改進,其應用也越來越廣泛。目前,幾乎所有的上皮都有利用Ussing Chamber研究的報道,包括消化道、呼吸道、生殖道、眼角膜、培養(yǎng)的單層上皮細胞等等。 研究的方向主要集中藥物吸收、營養(yǎng)吸收、腸道通透性、以及離子通道機制等。 

【系統(tǒng)配置】
KingTech尤斯灌流系統(tǒng)主要由三個單元組成:
(1)    尤斯室(Ussing chamber):固定上皮組織并維持活性
(2)    電壓電流鉗:測量上皮組織電生理信號
(3)    數據采集系統(tǒng):采集并記錄數據
由于實驗過程時間較長,而且一般要做模型組與對照組的比較,所以多通道系統(tǒng)是比較好的選擇。通道越多,一次獲得的數據越多,實驗成本也越低。而的系統(tǒng)為六通道。

KingTech(金泰公司)是專業(yè)和的尤斯系統(tǒng)制造商,其尤斯室品種涵蓋了所有可能的應用,從zui初的電極前插式尤斯室(P2300),到可自動灌流和停留循環(huán)的雙模式尤斯室(C3300),再到式的電極豎插式尤斯室(C4300)。另外還有適合于低轉運量的P2400尤斯室、用于分泌物滴定的P2300B尤斯室、以及于牛羊瘤胃上皮的C500尤斯室。其中的C4300電極豎插式尤斯室成為目前和的尤斯室。

【C4300電極豎插式尤斯室】

尤斯室是用來固定上皮組織并維持活性的裝置。它由兩個半室組成,中間插入固定組織的樣本夾。兩側半室裝有等量的、對稱的Ringer溶液,用于消除上皮兩側化學、機械及電性的驅動力。的C4300電極豎插式尤斯室是設計的產品,采用高透明亞克力材質制作而成,電極豎插在小室中。
不同于老式的U型玻璃管尤斯室,也不同于普通的電極水平安裝的尤斯室,C4300具有以下優(yōu)點:
?    體積小巧,結構緊湊,大大節(jié)省實驗空間;
?    容積2-8ml,節(jié)省藥物用量;
?    電極在小室上方,電極填充液不會滲漏,電極中不會進氣,鹽水也腐蝕不到電極接插件;
?    更換電極不需要先排空小室溶液。這種設計的好處是,既免除了繁瑣的操作,同時又避免組織長時間暴露在空氣中而降低存活時間;

【VCC MC6 Plus電壓電流鉗】
VCC MC6 Plus是六通道的電壓電流鉗,它包括六個獨立的電壓電流鉗模塊、一個內置的脈沖發(fā)生器、以及一套中控開關,并且附帶一個多檔位的標準信號模擬器。通過電極電纜與多通道尤斯室連接,可連續(xù)監(jiān)測組織的電壓、電流、電阻和電導;而中控開關可以同時控制六個通道的操作。
VCC MC6 Plus是在原VCC MC6的基礎上優(yōu)化改進的,每個通道都有流阻補償的量程旋鈕,對于不同面積的組織,不需要像VCC MC6那樣需要打開機箱調節(jié)量程。

【UCRS2.0數據采集系統(tǒng)】
UCRS2.0數據采集系統(tǒng)是專門設計用于多通道尤斯系統(tǒng)的數據采集系統(tǒng),包括DA1008采集器、UCRS2.0軟件以及數據電纜。DA1008采集器提供16位的分辨率和200K/s的采樣速率,通過USB線與計算機連接。UCRS2.0軟件提供譜圖曲線和原始數據表的實時記錄顯示,可通過DA1008采集器控制多通道電壓電流鉗的按鍵,并有脈沖開關功能。
UCRS2.0數據采集系統(tǒng)與VCC MC6 Plus電壓電流鉗連接,可同時采集多達八個通道的尤斯室組織信號。

【應用領域】
1、藥物代謝的研究:例如,藥物經腸道的吸收和轉運機制、藥物經皮膚的吸收及轉運機制。
2、胃腸道異常功能的研究,例如,正常的胃腸道黏膜組織、非正常的胃腸道黏膜組織,如缺血缺氧、炎癥反應、營養(yǎng)障礙等微生態(tài)環(huán)境改變時導致的胃腸道屏障功能的變化。
3、營養(yǎng)物質轉運機理研究:葡萄糖、小肽、游離脂肪酸、氨基酸和礦物質元素等物質吸收轉運效率的研究。
4、用于其他上皮組織的吸收:
?    腎小管內皮細胞對營養(yǎng)物質或藥物的排泌功能研究。
?    皮膚上皮細胞對營養(yǎng)物質或藥物的吸收機能的研究。
?    其他上皮組織,如大鼠結腸、小鼠回腸、青蛙皮膚、氣道上皮、視網膜上皮、膀胱壁、支氣管粘膜等。

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